超声波辅助提取地榆总鞣质工艺的优化,本文是有关超声波论文范文检索和鞣质和地榆和超声波有关毕业论文格式模板范文.
超声波论文参考文献：
彭诚,杨康,张世莹
（吉林农业科技学院,吉林吉林132000）
摘 要：目的：本文通过正交设计优选地榆总鞣质的超声辅助提取工艺.方法：指标为地榆中总鞣质含量,经过单因素考察以及正交实验对超声辅助提取时间、溶剂浓度、超声辅助提取次数、乙醇溶剂用量四因素进行研究.结果：得到最佳提取工艺为超声波辅助提取3 次,每次60 分钟,溶剂为15 倍量的料液比,浓度为70%的乙醇.结论：通过验证性实验,表明此方法提取工艺稳定可行.
关键词：地榆；总鞣质；正交设计；超声辅助提取
中图分类号：R284.2 文献标识码：A DOI 编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.24.080
地榆中药材是以植物地榆根入药,最早载于《神农本草经》中.植物地榆（Sanguisorba officinalis L.）为蔷薇科地榆属植物,为多年生草本,又名猪人参、血箭草、马软枣[1].地榆属植物大致分布于北温带周围区域,现如今在全世界发现的大概有30 多种[2].我国地榆属植物主要分布在东北、华北、西北、华东、中南及广西[3].中药地榆其性微寒,酸、涩,味苦、归肝、大肠经.并且具有解毒敛疮,凉血止血之功效,故在中医临床使用上多用于治疗崩漏、血痢、便血、水火烫伤、胃出血、肠炎等病症[4].地榆属植物中富含黄酮、皂苷、鞣质及甾体类成分.鞣质多具有抗肿瘤[5]、抗氧化[6]及降血脂及降血糖作用[7]等药理活性.本研究对地榆中主要的化学活性成分———鞣质提取工艺的优化,有利于地榆资源进一步的开发、利用,并为中药材有效成分的富集提供理论依据.
1 仪器、材料
1.1 仪器
UV-754 型紫外—可见分光光度计（上海有一仪器有限公司）,HJ-M4 磁力搅拌水浴锅（金坛市城西春兰实验仪器厂）,R-300 旋转蒸发器（瑞士步琦）,KQ-250B 型超声波清洗器（昆山舒美超声仪器有限公司）.
1.2 材料
本药材采于吉林省二道乡水库,经过吉林大学药学院王广树教授鉴定,确定本品为药材地榆（Sanguisorba officinalisL.）,没食子酸对照品150 毫克（经色谱分析,纯度>98％,济宁宏明化学试剂有限公司）.
2 方法与结果
2.1 测定总鞣质含量[8]
2.1.1 没食子酸标准品溶液的配备精密称定没食子酸标准品25 毫克,置于50 毫升棕色容量瓶中,加水稀释至刻度,量取10 毫升,置于100 毫升棕色容量瓶,加水再稀释至刻度,摇匀,放置备用（浓度为0.05 毫克/ 毫升）.
2.1.2 线性关系考察依次精确量取没食子酸标准品溶液,分别为1 毫升、2.0 毫升、4.0 毫升、6.0 毫升、8.0 毫升、10.0 毫升,再各自置于50 毫升容量瓶中,每组均加磷钼钨酸2 毫升,加水23 毫升、22 毫升、20 毫升、18 毫升、16 毫升、14 毫升稀释,加29%Na2CO3 溶液至刻度后摇匀,放置30 分钟,依照（《中国药典》2015 年版第四部通则）所述,利用紫外可见分光光度法,在760 纳米波长处测定吸光度A,并以吸光度A 为纵坐标y,以浓度C 为横坐标x,得回归方程y等于59.427x+0.0268,r等于0.9997.结果表明,没食子酸标准品（1.0~10.0μg/mL）浓度范围内线性关系较好.
2.1.3 供试品溶液称取地榆浸膏适量,充分干燥,称重,置于500 毫升容量瓶中,加水300 毫升溶解,溶液过夜放置,超声波处理20 分钟至充分溶解,于室温下静置冷却,加水稀释至刻度,摇匀静置并滤过,弃去初滤液100 毫升,取续滤液20 毫升移至200 毫升容量瓶中,并加水稀释至容量瓶刻度,充分摇匀,得供试品溶液.
2.1.4 地榆总鞣质含量测定法总酚：量取供试品溶液1 毫升,置于50 毫升容量瓶中,依“2.1.2 项下”方法测定吸光度A,即得.
未被吸收的多酚：量取供试品溶液30 毫升,加入150 毫升具塞锥形瓶中,再加入干酪素0.9 克,置于30℃水浴下保温1小时,时时振摇,取出之后放冷,摇匀后滤过,并弃初滤液,量取滤液4 毫升,置于50 毫升棕色容量瓶,依“2.1.2 项下”方法测定吸光度,地榆总鞣质的含量计算公式为：M 鞣质得含量＝M总酚含量－M 未被吸收的多酚含量
2.2 单因素考察
2.2.1 超声辅助提取的次数取干燥的地榆根粉末适量,加入15B/V 的60% C2H5OH,分别提取1、2、3、4、5 次,每次60 分钟.提取物经测定吸光度,计算含量结果提取次数对的总鞣质的提取量有一定差异,但3、4、5 次差异不大,故而选定超声次数1、2、3 次作为正交试验考察的因素水平,进一步考察超声辅助提取次数对提取工艺的影响.
2.2.2 超声辅助提取的时间取干燥的地榆根粉末适量,加入15B/V 的60% C2H5OH 溶液,并依此超声提取20 分钟、40 分钟、60 分钟、80 分钟、100 分钟.提取物经测定吸光度,计算含量结果表明20 分钟到60 分钟提取量逐渐上升,故而选定45分钟,60 分钟,75 分钟作为正交实验考察的因素水平,进一步考察超声辅助提取的时间对提取工艺的影响.
2.2.3 溶剂浓度取干燥的地榆根粉末适量,分别加入15B/V的30% 、40% 、50% 、60% 、70% 、80% C2H5OH, 超声提取60 分钟.提取物经测定吸光度, 计算含量结果表明70% 、60%C2H5OH 提取结果最好,故而选定50%、60%、70% C2H5OH 溶液作为正交实验考察的因素水平,进一步考察溶剂浓度对提取工艺的影响.
2.2.4 溶剂用量取干燥的地榆根粉末适量,分别加入5、10、15、20、25、30B/V 的60%C2H5OH,超声提取60 分钟.提取物经测定吸光度,计算含量结果表明15B/V 的60% C2H5OH 提取结果最好,故而选择10、15、20B/V 的溶剂用量,作为正交实验考察的因素水平,进一步考察溶剂用量对提取工艺的影响.
2.3 L9 （34）正交试验设计
通过单因素实验的结果考察,选择超声辅助提取次数A、超声辅助提取时间B、溶剂浓度C、溶剂用量D 为考察的四组因素,采用L9 （34）正交试验设计方法,确定地榆中总鞣质的最佳提取工艺为A3C3B2D2,即为超声波辅助提取3 次,每次60 分钟,溶剂为15B/V 的70%C2H5OH.通过显著性检验及方法分析,得出各因素对地榆中总鞣质提取效果影响的主次顺序为A>C>B>D.依照正交试验的结果重复试验5 次,计算得RSD 为1.74%.结果表明,按此最佳提取工艺操作,工艺稳定可行.
2.4 讨论
本文根据《中国药典》2015 年版第四部通则,以没食子酸作为标准品考察线性关系,并得出地榆总鞣质含量.利用超声波辅助提取,通过多个单因素的考察,确定选取超声辅助提取次数（A）、超声辅助提取时间（B）、溶剂浓度（C）、溶剂用量（D）等影响因素的各自三个水平条件,利用正交试验设计,优化地榆中总鞣质的提取工艺,为超声提取3 次,每次60 分钟,溶剂为15B/V 的70%C2H5OH.通过重复性考察,表明该结果的优化工艺稳定可行.
近些年,鞣质类成分在国内的研究的不断加深,地榆中总鞣质的生理活性受到了研究工作者广泛的关注.本文对地榆药材中总鞣质的提取工艺进行优化,有利于今后对地榆药材资源的开发利用,提高地榆总鞣质的提取效率,对生物活性成分的富集提供一定理论依据.
参考文献
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[5] 金哲雄,齐典.刺玫果鞣质预防肿瘤作用研究[J].中华中医药学刊,2007,25(04):647-648.
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[7] 姚思宇,赵鹏,刘荣珍,等.鞣质降血脂作用的动物实验研究[J].中国热带医学,2004,4(06):45-946.
[8] 国家药典委员会.中国药典（四部）[M].北京:中国医药科技出版社,2015: 通则203.
作者简介：彭诚,硕士,吉林农业科技学院,助教,研究方向：天然药物活性成分研究.
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