生活垃圾堆肥菌剂诱导桔梗抗腐皮镰刀菌,该文是关于垃圾类毕业论文开题报告范文和镰刀菌和桔梗和菌剂有关毕业论文开题报告范文.
垃圾论文参考文献：
摘 要：以桔梗腐皮镰刀菌为对峙菌,从生活垃圾堆肥中分离的14株放线菌采用三点接种法筛选1株对桔梗腐皮镰刀菌抑制效果最强的放线菌G2,再用放线菌G2菌液诱导桔梗幼苗,研究生活垃圾堆肥放线菌对桔梗的抗病性.结果表明,垃圾堆肥放线菌G2菌液对桔梗腐皮镰刀菌抑制效果最强,抑制率为37.8%.用不同浓度的堆肥放线菌G2菌液诱导处理的桔梗幼苗SOD活性、POD活性、叶绿素含量与CK相比均有显著升高（P<0.05),而MDA含量则有显著下降趋势（P<0.05),桔梗幼苗MDA含量与SOD活性、POD活性、叶绿素含量均呈现高度显著负相关（P<0.001).当垃圾堆肥放线菌G2菌液浓度为2×107 CFU·mL－1时,诱导处理的桔梗幼苗SOD活性、POD活性、叶绿素含量均显著高于其他处理（P<0.05),而MDA含量均显著低于其他处理（P<0.05),并能产生较强的抗病性.
关键词：垃圾堆肥；放线菌；桔梗；腐皮镰刀菌；诱导抗病性
中图分类号：S436.412
文献标识码：Ａ 文章编号：1674-0033（2016）06-0058-05
A Study on Induction of Platycodon grandiflorum to Resist Fusarium solani by Municipal Refuse Compost Inocula
LI Dui-shu
(College of Biopharmaceutical Engineering and Food Science, Shangluo University, Shangluo 726000, Shaanxi)
Abstract:Fusarium solani of Platycodon grandiflorum as confrontation bacteria. one strain actinomycetes G2 was screened with three inoculation method from 14 strains actinomycetes separated by municipal refuse compost, and Platycodon grandiflorum seedlings were induced by actinomycetes G2 to the disease resistance of Platycodon grandiflorum by municipal refuse compost actinomycetes. The results showed that municipal refuse compost actinomycetes G2 had the strongest inhibitory effect to Fusarium solani of Platycodon grandiflorum, and inhibition ratio was 37.8%. With Platycodon grandiflorum seedlings induced by different concentrations of actinomycetes G2, the activities of SOD, activities of POD and contents of chlorophyll in Platycodon grandiflorum seedlings were significantly higher than CK（P<0.05), while the contents of MDA in Platycodon grandiflorum seedlings were significantly lower than CK（P<0.05). The contents of MDA and activities of SOD, activities of POD, contents of chlorophyll had highly significant negative correlation（P<0.001). With Platycodon grandiflorum seedlings induced by 2×107 CFU·mL－1 of concentration on municipal refuse compost actinomycetes G2, activities of SOD, activities of POD and contents of chlorophyll in Platycodon grandiflorum seedlings were significantly higher than other treatment（P<0.05), but the contents of MDA were significantly lower than other treatment（P<0.05). And 2×107 CFU·mL－1 of concentration on municipal refuse compost actinomycetes G2 couldt produce strong disease resistance.
Key words:municipal refuse compost; actinomycetes; Platycodon grandiflorus; Fusarium solani; induced resistance
生活垃圾堆肥是通过多种微生物群体共同降解有机废弃物,使生活垃圾资源化、无害化.生活垃圾堆肥中微生物种群结构与堆肥有机物质含量密切相关.任静[1]研究了接种菌剂对牛粪堆肥过程中微生物的生命活动能促使堆体温度迅速升高,随着堆肥时间的推进酶活性逐渐升高,菌剂的加入有利于游离腐殖酸的生成.刘月[2]研究了添加菌剂能增多堆肥中各种微生物的数量和种类,加速木质素降解,提早腐熟堆肥.桔梗为桔梗科（Platycodon grandiflorus(jacp.)A.DC.）,多年生草本植物,主要以根入药,食用价值较高[3],但是桔梗种植往往管理较粗放,桔梗经常被多种病害侵染较严重,直接影响了桔梗入药的品质和质量.尤其桔梗根腐病（半知菌类镰刀菌）发病较频繁,桔梗根腐病是一种土传病害,较难防治.利用诱抗剂诱导植物使其产生抗性并能防治病害[4],还能增强植物植保素的积累,加强细胞壁增厚[5],增强过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶、超氧化物歧化酶等多种酶活性[6],诱导抗病的防治既环保又经济.本文从农村的猪粪、牛粪以及厨余垃圾腐熟的堆肥中分离纯化放线菌,筛选出抗桔梗腐皮镰刀菌效果最佳的1株放线菌作为诱导剂,用不同浓度的堆肥菌剂诱导桔梗,研究桔梗的保护酶活性、丙二醛含量、叶绿素含量,从而反映堆肥放线菌对桔梗的抗病效果.这不仅能解决大量的生活垃圾的污染问题,而且可以合理地利用自然资源,为社会、经济领域提供一定应用价值.
1 材料与方法
1.1 材料
生活垃圾堆肥：陕西省商洛市农村的猪粪、牛粪以及厨余垃圾腐熟的堆肥.
腐皮镰刀菌：商洛市桔梗根部分离（生物医药与食品工程实验室提取）,桔梗种子（市场购买）.
1.2 方法
1.2.1 放线菌的筛选
从生活垃圾堆肥中分离纯化的放线菌培养2代,取活化的菌种接种于装有50 mL高氏1号液体培养基的250 mL三角瓶中,130 r·min－1,28 ℃培养5 d.取菌种采用显微镜直接计数法得到生活垃圾堆肥放线菌菌液的浓度为1×109 CFU·mL－1,分别将浸有各种放线菌菌液的小圆滤纸片贴在平板,无菌水为CK,然后在滤纸片周围接种腐皮镰刀菌,直到对照（CK）培养皿中的腐皮镰刀菌长满时,计算放线菌的抑制率,从而筛选出抑菌效果最佳的1株放线菌.
1.2.2 菌液配制
将筛选的这株放线菌发酵液用孔径为0.22 μｍ的微孔滤膜过滤,取一部分过滤液分别配制成浓度为1×107、2×107、1×108、1×109 CFU·mL－1的溶液.
1.2.3 放线菌诱导桔梗幼苗
将配制好的放线菌发酵液浓度为1×107、2×107、1×108、1×109 CFU·mL－1的溶液分别喷洒盆栽的桔梗幼苗,以溶液不流为止,用无菌水作为CK,每组设3个重复,分别在第0、2、4、6、8、10 d采样,测定其超氧化物歧化（SOD）酶活性、过氧化物（POD）酶活性、丙二醛（MDA）含量、叶绿素的含量.
1.2.4 生理生化指标的测定
超氧化物歧化酶（SOD）活性采用四氮唑蓝光还原法测定[7].过氧化物酶（POD）活性采用愈创木酚法测定[8].丙二醛（MDA）含量采用硫代酸比色法测定[9-10].叶绿素的含量采用丙酮法测定[11].
2 结果与分析
2.1 生活垃圾堆肥放线菌的筛选
由表1可见,从生活垃圾堆肥中提取的14株放线菌,有11株放线菌对桔梗腐皮镰刀菌有抑制作用,其中堆肥放线菌菌株G2对桔梗腐皮镰刀菌抑菌作用最大,抑制率为37.8%.
2.2 堆肥放线菌对桔梗幼苗生理特征的影响
2.2.1 堆肥放线菌对桔梗幼苗SOD活性的影响
由图1可知,经不同浓度的堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗,随着菌液浓度的增高,桔梗幼苗SOD活性逐渐升高,升高到菌液浓度为2×107 CFU·mL－1时,桔梗幼苗SOD活性最大,随后再增加菌液浓度桔梗幼苗SOD活性逐渐降低,但比CK诱导处理的桔梗幼苗SOD活性强.在第0~10 d桔梗幼苗SOD活性均先升高后降低.堆肥放线菌菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗SOD活性在第0~10 d总是高于其他浓度处理,差异显著（P<0.05).堆肥放线菌菌液浓度为1×109、1×108、2×107、1×107 CFU·mL－1和CK均在诱导处理的第6 d桔梗幼苗SOD活性达到峰值,分别为60.24、63.00、79.23、69.03、63.89 U·g－1·h－1.堆肥放线菌菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗SOD活性的峰值分别比堆肥放线菌菌液浓度为1×109、1×108、1×107 CFU·mL－1和CK提高了24.15%、14.78%、25.76%、31.14%.可见,堆肥放线菌菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导桔梗幼苗抗病性较强,说明低浓度的堆肥放线菌菌液能更有效地诱导桔梗幼苗提高SOD活性,从而增强桔梗抗病性能力.
2.2.2 堆肥放线菌对桔梗幼苗POD活性的影响
POD作为生物体的一种重要的氧化还原酶,能杀灭病原菌或阻止病原物质入侵,其活力与抗性密切相关[11].如图2所示,不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗POD活性提高具有显著性（P<0.05),桔梗幼苗POD活性均呈单峰趋势变化,并且均在诱导处理的第6 d达到峰值.不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗POD活性与CK诱导处理的桔梗幼苗POD活性差异显著（P<0.05),堆肥放线菌菌液浓度为2×107、1×108、1×109、1×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗POD活性峰值比CK诱导处理的桔梗幼苗POD活性峰值分别提高了169.49%、153.38%、66.95%、51.69%.可见,堆肥放线菌（G2）菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗POD活性升高较大,说明低浓度的堆肥放线菌菌液诱导桔梗幼苗增强POD活性能力较强,从而使桔梗幼苗提高了抗病性.
2.2.3 堆肥放线菌对桔梗幼苗MDA含量的影响
如图3所示,不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗MDA含量比CK诱导处理的桔梗幼苗MDA含量显著降低了（P<0.05),随着堆肥放线菌（G2）菌液浓度的升高,诱导处理的桔梗幼苗MDA含量逐渐降低,升高到浓度为2×107 CFU·mL－1时,诱导处理的桔梗幼苗MDA含量最低,并且与其他诱导处理差异显著（P<0.05),再升高堆肥放线菌（G2）菌液浓度诱导处理的桔梗幼苗MDA含量又逐渐升高.同一浓度不同时间堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗MDA含量总是先降低后升高,只是CK诱导处理的桔梗幼苗MDA含量变化不显著（P<0.05).说明堆肥放线菌（G2）菌液能激活桔梗幼苗的各种保护酶活性,防御MDA含量增加,从而降低了对植物膜质的伤害程度.可见,堆肥放线菌（G2）菌液浓度为2×107 CFU·mL－1抑制桔梗幼苗MDA含量降低的效果最佳,对桔梗抗病性就越强.
2.2.4 堆肥放线菌对桔梗幼苗叶绿素含量的影响
不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗,对桔梗叶绿素含量的提高有显著地作用,见图4.不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗叶绿素含量均先升高后降低,而CK处理的桔梗幼苗叶绿素含量变化差异不显著（P>0.05),在诱导处理后第6 d桔梗幼苗叶绿素含量均达到了峰值.堆肥放线菌（G2）菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗叶绿素含量影响最显著（P<0.05),并且峰值分别比1×109、1×108、2×107、1×107 CFU·mL－1和CK均诱导处理的桔梗幼苗叶绿素含量峰值提高了23.69%、33.91%、92.86%、328.76%.由此可知,堆肥放线菌（G2）菌液浓度为2×107 CFU·mL－1诱导处理的桔梗幼苗叶绿素含量升高越多,对桔梗抗病性就越强.
2.3 堆肥放线菌对桔梗幼苗生理指标的相关性
由表2可见,用不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗,在0～10 d 桔梗幼苗的POD活性、SOD活性、叶绿素含量与MDA含量均两两相关,MDA含量与POD活性、SOD活性、叶绿素含量均呈现出高度显著负相关（P＜0.001）,POD活性分别与叶绿素含量、SOD活性均呈现出高度显著正相关（P＜0.001）；叶绿素含量与SOD活性也呈现出高度显著正相关（P＜0.001）.可见,不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗MDA含量越低,POD活性、SOD活性和叶绿素含量就越高,桔梗的抗病性就越强.
2.4 堆肥放线菌对桔梗幼苗生理指标的主成分分析
由表3可见,用主成分分析不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗POD活性、SOD活性、叶绿素含量和MDA含量对桔梗抗病性的作用均比较重要,但是POD活性、SOD活性和MDA含量的变化比叶绿素含量变化更显著,并且MDA含量变化与POD活性、SOD活性和叶绿素含量变化是负相关的.
3 结论与讨论
生活垃圾堆肥中有益微生物是非常丰富的,有细菌、放线菌、酵母菌等.垃圾堆肥中放线菌能产生大量的抗生素,调节微生物区系,对有机物有很强的降解能力,可降解难分解的生活垃圾中丰富的纤维素、木质素等,从而降解腐殖质,加速养分转化,有利于植物更好地吸收和利用这些营养物质,还可以作为诱导剂控制植物病原传播.SOD、POD是保护植物系统的主要酶,SOD和POD总是协调一致,SOD、POD活性越高,清除自由基的能力就越强,植物的抗病能力也就越强.MDA是脂质过氧化的主要产物之一,其积累是活性氧毒害作用的表现.叶绿素含量是反映光合强度的重要指标,叶绿素含量的高低直接影响植物的生长状态及商品的品质,是高等植物进行光合作用最重要的色素, 与光合作用密切相关[12-13].
本研究从生活垃圾堆肥中筛选的14株放线菌,其中有11株对桔梗腐皮镰刀菌具有抑制作用,堆肥放线菌菌株G2菌液对桔梗腐皮镰刀菌的抑制效果最佳,抑制率为37.8%.用不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗,均是随着菌液浓度的升高,桔梗幼苗的SOD活性、POD活性、叶绿素含量也随之升高,但浓度升高到2×107 CFU·mL－1,再升高菌液浓度,桔梗幼苗的SOD活性、POD活性、叶绿素含量随之降低,但是在诱导处理后第0~10 d堆肥放线菌（G2）菌液处理总是高于CK；而桔梗幼苗的MDA含量与SOD活性、POD活性、叶绿素含量均呈现出高度显著负相关关系（P＜0.001）,所以,用不同浓度堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理的桔梗幼苗MDA含量总是低于CK.用主成分分析法分析堆肥放线菌（G2）菌液诱导处理桔梗幼苗的SOD活性、POD活性、叶绿素含量、MDA含量变化对桔梗诱导抗病性的作用均是非常重要的.隋丽[14]研究放线菌769对水稻抗稻瘟病的诱导抗病性,陈光[15]研究链霉菌769浇灌处理的大豆幼苗不但使PAL活性、PPO活性、POD活性、SOD活性、叶绿素含量、β-1,3-葡聚糖酶活性和对照相比均有显著升高,CAT活性、MDA含量则有所降低,而且可诱导大豆提高抗疫霉根腐病,此研究结论均与本研究结论基本一致.
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本文总结:上文是一篇适合不知如何写镰刀菌和桔梗和菌剂方面的垃圾专业大学硕士和本科毕业论文以及关于垃圾论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料.
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