植物病原菌快速检测技术方法,本文是检测技术本科毕业论文范文跟病原菌和快速检测和植物类论文范文资料.
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植物病害是限制农作物产量和品质的主要因素之一.在农作物种植前或收获后进行植物病原菌检测,不仅可以对病害进行提前预警,也可以检测农产品的品质.传统的植物病原菌分子生物学检测方法往往需要在实验室进行,并且需要借助多种专业的仪器设备.为了在田间或其他现场能够对病原菌进行快速定量检测,利用便携且操作简单的仪器设备进行病原菌检测显得尤为重要.经过分析发现,环介导等温扩增（LAMP）,是近年来兴起的一种新的聚合酶链式扩增反应体系,这种方法只需要一个恒定的反应温度,所使用的反应仪器简单.
1 试验材料待检测的病原菌包括禾谷镰刀菌、肿囊腐霉菌、弯孢叶霉菌和玉蜀黍黑粉菌.阴性对照为去离子H2O.2 试剂和仪器设备试验试剂包括反应DNA扩增试剂盒（广州迪澳生物科技有限公司）.每种病原菌对应一套LAMP引物,每套引物均由6 条引物组成.
反应在广州双螺旋基因科技有效公司生产的ZYDS1荧光恒温扩增仪器（见图1）上进行.反应温度设定为63 ℃,反应时间设定为45 min.反应结束后,根据仪器自带的程序判断反应结果.
图1 ZYD-S1荧光恒温扩增仪器3 试验方法和结果禾谷镰刀菌、肿囊腐霉菌、弯孢叶霉菌和玉蜀黍黑粉菌的DNA和去离子H2O分别作为反应的模板配制反应体系.反应管在ZYD-S1加热模块上的布局如图2 所示：阴性对照（A1/B1,A6/B6,A7/B7,A8/B8）,禾谷镰刀菌（A2/B2）,肿囊腐霉菌（A3/B3）,弯孢叶霉菌（A4/B4）和玉蜀黍黑粉菌（A5/B5）.反应完成后,根据反应自带程序产生的扩增曲线图可以看出：所有的阴性对照均没有有效扩增,而4 种植物病原菌均产生有效的扩增（见图3）.这就表明LAMP体系能够准确、快速地检测出植物病原菌.
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