无菌性脑膜炎主要病原Echovirus30快速检测系统的建立,本文是关于检测系统类论文怎么写和脑膜炎和Echovirus30和检测系统相关论文范文.
检测系统论文参考文献：
闫 强
厦门万泰凯瑞生物技术有限公司 福建省厦门市 361005
【摘 要】目的：建立一套造成无菌性脑膜炎的主要病原Echovirus 30 的快速检测系统,增加临床病例的快速筛查和检测.方法：通过对Echovirus 30 病毒基因组的核酸序列比对,设计出针对Echovirus 30 的特异性检测引物,并对2011 年5 月-8 月间在中国南方地区的一次无菌性脑膜炎爆发流行进行报道和病原检测.结果：在188 例无菌性脑膜炎临床病例中,98.9% 为<15 岁的儿童.所有标本使用肠道病毒通用引物检测阳性的为109 例,其中使用E30 特异性VP1 段引物检测阳性的79 例,对79 株E30 的VP1 段测序分型显示,引起本次爆发流行的E30 由Ⅶ型造成,而与Ⅰ - Ⅵ型的同源性为69.8%-87%.结论：本研究成功建立了一套快速、简便、特异的Echovirus 30 检测系统,并依据该系统第一次报道了在中国南方地区引起无菌性脑膜炎爆发的肠道病毒病原.
【关键词】无菌性脑膜炎；主要病原；临床
无菌性脑膜炎中有35-83% 由肠道病毒引起[1],其中Echovirus 占到80-90%[2],Echovirus 30（E30）是其最主要的病原体,E30 可通过粪- 口途径传播,感染后通常临床症状不明显,但也有部分病例可引起急性发热或神经系统并发症如脑炎、脑膜炎、胸膜炎、心肌炎、结膜炎等.由E30造成的无菌性脑膜炎在世界范围内广泛流行,尤其是最近10 年来其爆发流行有逐渐增多的趋势.
1 材料和方法
1.1 标本的收集
214 份临床咽拭子标本采自2011 年5月22 日至8 月6 日间有无菌性脑膜炎临床症状的病例,咽拭子在标本保存液中充分搅动以洗下拭子上粘附的病毒及含有病毒的细胞后立即提取病毒RNA 或放入-20℃保存.
1.2 RNA 的提取
从200μl 咽拭子中进行病毒RNA的提取, 使用磁珠法进行（GenMagBiotechnology,beijing,China）, 严格按照说明书操作,最终使用50μl 的DEPC 处理的水进行洗脱.提取的病毒RNA 直接进行RT-PCR 检测或存放于-80℃备用.
1.3 序列分析
测得的序列使用SeqMan 软件(La s e rgene pa ckage , DNASTAR Inc ,Madison, WI, USA) 进行拼接.序列比对采用ClustalW 方法（MEGA4.0,www.megasoftware.net）,基因进化树构建采用neighbor-joining 方法（MEGA 4.0,www.megasoftware.net）.
2 结果
所有188 例临床病例中有98.9% 的病例年龄小于15 岁,男女比为2.3：1（131：57）,在年龄分布上本次无菌性脑膜炎爆发中的病例主要集中于3-7 岁（88 例,46.8%）及10-15 岁（48 例,25.5%）,该年龄分布特点与已报道的手足口病的年龄分布有所不同,手足口病病例主要集中于1-5 岁的儿童.在无菌性脑膜炎爆发期间6、7 月是其主要流行期,占到所有病例数的85.1%.对本次无菌性脑膜炎暴发流行中的188 例临床病例标本进行5’UTR 区的肠道病毒通用诊断引物的检测,共有109 例诊断为肠道病毒感染（60%）.其中79 例经过E30 VP1 特异性检测引物诊断为阳性.
在GenBank 上下载76 株之前报道的E30 各型及亚型的分离株VP1 序列作为参考株与本次无菌性脑膜炎爆发收集的79 株E30-VP1 序列进行同源性比对,构建进化树,以核苷酸序列存在12% 差异作为基因型的分型标准,所有序列可分为7 个基因型（Ⅰ - Ⅶ）,各基因型型间核苷酸同源性在63.9%-87.2% 之间,型间氨基酸同源性在91.8%-98.6% 之间,型内核苷酸同源性在93.7%-97.9%,型内氨基酸同源性在98.4%-99.7% 之间,在本研究中分离到的79 株E30 均为Ⅶ型.
3 讨论
E30 是造成无菌性脑膜炎爆发流行的主要肠道病毒,其流行特点、基因多样性在欧美和亚太地区有一定报道,但在中国大陆地区对其流行情况的报道则相对较少,其原因主要是还缺乏快速、特异的诊断方法,同时对中国南方地区造成无菌性脑膜炎的E30 流行情况也从未进行过相关研究.在2011 年春夏季节,在中国南方的厦门市及周边地区出现了一次无菌性脑膜炎的爆发流行,我们通过建立一套针对性较强的快速诊断系统,并对临床标本直接进行PCR 扩增从而证明该系统具有较好的检测灵敏度和准确性,从而确定此次爆发中E30 均为同一基因型,提示较好的监控手段将有利于新的暴发流行的控制和预防.
参考文献
[ 1 ] C h o n m a i t r e e T , B a l d w i n C D ,Lucia HL. Role of the virologyl a b o r a t o r y i n d i a g n o s i s a n dm a n a g e m e n t o f p a t i e n t s w i t hcentral nervous system disease.C l i n M i c r o b i o l R e v . 1 9 8 9Jan;2(1):1-14.
[ 2 ] K e G M , L i n K H , L u P L , T u n g Y C ,Wang CF,Ke LY,et al.Molecularepidemiology of Echovirus 30 inTaiwan,1988-2008.Virus Genes.2011Apr;42(2):178-88.
简而言之:上文是关于检测系统方面的大学硕士和本科毕业论文以及脑膜炎和Echovirus30和检测系统相关检测系统论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料.
79仔猪梭菌性肠炎的临床症状、鉴别诊断与其防控
1 流行病学在土壤、尘埃、下水道以及人畜肠道中都存在该病菌,尤其是在发病猪群中的母猪肠道内含量较多,往往经由粪便排到体外,对猪圈垫草以及泥土……环境造成污染,从而导致新生仔猪相对更容易感染存在于环境.
荧光定量快速检测系统的意义与作用
1 快速检测技术的意义和作用近些年,频繁的食品安全问题事件,使得食品安全日益成为全社会关注的焦点,不断引起社会对畜产品质量安全的担忧 截止目前,食品中有害化合物主要来源于兽药、农药、激素、霉菌毒素和.
食用香辛料抑菌性与抗氧化性现状
摘 要本文在论述香辛料调味作用的同时,也简单阐述了香辛料的防腐抑菌作用和抗氧化作用 关键词香辛料；抑菌性；抗氧化性AbstractIn this paper, the floring effect o.