葡萄叶片叶绿素含量测定方法比较,本文是关于叶绿素相关毕业论文格式范文和葡萄和叶绿素和测定方法方面毕业论文题目范文.
叶绿素论文参考文献：
1引言
葡萄几乎占全世界水果产量的1/4,在我国北方和南方都有种植.叶绿素是光合作用最重要的产物,同时叶绿素的含量也是植物重要的生理指标之一.因此,对葡萄叶绿素提取方法的研究意义重大.叶绿素含量测定方法一般有分光光度法、活体叶绿素仪法和光声光谱法,以分光光度法应用最广泛.因所用提取叶绿素的溶剂不同又有多种测定方法,早期叶绿素测定广泛采用Aron法,但该方法由于先研磨后除渣,工作量大、步骤多,且容易受光氧化而引起偏差,不适宜田间大量样品的提取和测定.陈福明和张宪政等分别对丙酮、乙醇和水不同配比混合液浸提效果进行了深入的研究,得出适宜提取叶片叶绿素的混合液.洪法水等研究认为,用丙酮和乙醇的混合液提取植物叶片叶绿素比单一提取液效果要好.而徐邦发等为解决通常采用分光光度计费工耗时、易引起离体叶绿素的光分解而造成误差等问题,通过比较几种不同混合提取液的提取,提出测定棉花叶片叶绿素含量的丙酮溶液浸提法,该法具有准确、简单易行的优点.
本试验利用体积分数为80%的丙酮、体积分数为95%的乙醇和丙酮—乙醇混合液（体积分数为80%的丙酮与体积分数为95%的乙醇按体积比1∶1混合)等3种提取液,浸泡法提取测定葡萄叶片叶绿素含量的效果进行了比较研究,旨在为大量葡萄叶片样本叶绿素含量的测定提供理论依据.
2试验材料与方法
2.1试验材料试验于2015年5月进行,供试的葡萄叶片为种植于宁夏防沙治沙职业技术学院校园内2年生植株.
2.2试验方法从葡萄健康植株分别随机抽取30个叶样,称取0.2g试材于试管中,将叶片剪成2mm宽的碎条.用体积分数为80%的丙酮、体积分数为95%的乙醇和丙酮—乙醇混合液（体积分数为80%的丙酮与体积分数为95%的乙醇按体积比1∶1混合)3种提取液,在室温下用直接浸提法提取叶绿素,重复3次.浸提法参照张志良方法.浸提在黑暗中进行,每支试管加入浸提液20mL,并不时摇动,等叶片变白,约14小时后定容25mL,测定吸光值.室温下以相应试剂为参比,分别在645nm和663nm处测定吸光度,由Arnon公式计算叶绿素a与叶绿素b的含量.
叶绿素a含量（FWmg/g）等于（12.7D663-2.69D645）×V／（1000×W）
叶绿素b含量（FWmg/g）等于（22.9D645-4.68D663）×V／（1000×W）
叶绿素总量（FWmg/g）等于（20.2D645+8.02D663）×V／（1000×W）
式中,D663、D645分别为相应波长下的光叶绿素密度值,V为提取液体积（单位为mL),W为叶片鲜重（单位为g）.
所有数据采用Excel2003进行数据整理与统计分析.
3结果与分析
3.1不同提取方法提取叶绿素的效果由表1可知,用混合液（80%丙酮∶95%乙醇等于1∶1）浸提的叶绿素含量（单位为mg/g）显著高于其他几种处理,可达1.1768；用95%乙醇进行提取的叶绿素含量最低,为1.0253.
3.2不同提取方法光稳定性的比较由表2至表4可知,叶绿素总含量降解值以80%丙酮最快,为0.5367；其次为95%乙醇浸提法,为0.4015；混合液(95%乙醇∶80%丙酮等于1∶1)浸提法较慢为0.3204.说明,丙酮提取的叶绿素在光下极不稳定.而混合液(95%乙醇∶80%丙酮等于1∶1)浸提法可获得较高的叶绿素含量,同时在光下也有较好的稳定性.随见光时间的延长,各种提取方法均以叶绿素a降解值远远低于叶绿素b.不同提取方法叶绿素a降解值在0.1216～0.2204之间变化,而叶绿素b降解值0.1988～0.3163之间变化.说明叶绿素b降解速度快于叶绿素A,在可见光下叶绿素b较叶绿素a更易降解.
4结论
混合液浸提法(95%乙醇∶80%丙酮等于1∶1)提取到的叶绿素不但含量高于95%乙醇浸提法和80%丙酮浸提法,且对光的稳定性也优于95%乙醇浸提法和80%丙酮浸提法.单一乙醇浸提所得叶绿素含量较低,且不稳定；当加入丙酮后叶绿素提取更完全,且稳定性较好.随着可见光时间的延长,叶绿素b在三种浸提法中降解值均远远大于叶绿素a,说明叶绿素b降解速度快于叶绿素a.结果表明,影响叶绿素提取效率的关键是叶绿素b的提取速度及其稳定性.
（参考文献略）
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